ELISA檢測試劑盒注意事項(xiàng):
1試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2,濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品fl孔的OD值),請先將樣本稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請后乘以稀釋倍數(shù)(x5xn)。
5封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。顯色劑B請避光保存。
7,嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.如以說明書有異,以說明書為準(zhǔn)。
ELISA檢測試劑盒操作技術(shù)要求:
1、加樣量的準(zhǔn)確與否,直接影響抗原抗體結(jié)合物的濃度,直至顯色的深淺。吸嘴插入血清不可太深,若插入太深,吸嘴外壁可能粘連太多血清,輕微的抖動(dòng)動(dòng)即可將吸咀外壁的血清濺入其它包被孔中,造成交叉污染。加樣時(shí)應(yīng)盡可能的垂直加樣,并加在包被孔的底部,不可加在孔的上部。標(biāo)本量大時(shí),可考慮使用排槍加試劑,可提高速度,但使用排槍時(shí)應(yīng)注意吸嘴一定要裝好,不可松動(dòng),否則會(huì)影響加樣量的準(zhǔn)確度。加樣時(shí)保持顯色劑不外流,顯色劑應(yīng)避免接觸金屬器械。加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
2、加樣時(shí)間間隔對結(jié)果也有一定的影響,在競爭法試驗(yàn)中,理論上應(yīng)該是標(biāo)本與酶標(biāo)抗體混合后同時(shí)加入反應(yīng)孔,若標(biāo)本先于酶標(biāo)抗體加入反應(yīng)孔,則標(biāo)本會(huì)先與包被抗體進(jìn)行反應(yīng),造成特假陽性。若是有干擾物質(zhì)存在時(shí)表現(xiàn)明顯,在公平條件下,干擾物質(zhì)與包被抗體的結(jié)合能力會(huì)低于標(biāo)本,而在非公平條件下,干擾物質(zhì)會(huì)優(yōu)先與包被抗體進(jìn)行結(jié)合,出現(xiàn)假陽性。做HBcAb項(xiàng)目時(shí),若標(biāo)本與酶加樣時(shí)間間隔太長,會(huì)引起吸光度的趨勢性變化,會(huì)造成吸光度的降低。特別是針對臨界值標(biāo)本,出現(xiàn)假陽性。
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