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 血細(xì)胞分析儀是醫(yī)院臨床檢驗(yàn)應(yīng)用非常廣泛的儀器之一，是指對一定體積內(nèi)血細(xì)胞數(shù)量及異質(zhì)性進(jìn)行分析的儀器。20世紀(jì)9o年代以來，隨著電子技術(shù)、流式細(xì)胞技術(shù)、激光技術(shù)、電子計(jì)算機(jī)技術(shù)和新熒光化學(xué)物質(zhì)等各種在血細(xì)胞分析儀中的應(yīng)用.使血細(xì)胞分析儀的檢測原理不斷完善、測量參數(shù)不斷增加、檢測水平不斷提高.尤其在白細(xì)胞五分類技術(shù)方面，已發(fā)展到利用多項(xiàng)技術(shù)（如射頻、細(xì)胞化學(xué)染色、流式細(xì)胞術(shù)和熒光染色技術(shù)等）聯(lián)合同時檢測一個白細(xì)胞.再用先進(jìn)的計(jì)算機(jī)技術(shù)區(qū)分、辨別經(jīng)上述方法處理后的各自細(xì)胞間的細(xì)胞差別.綜合分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，得出較為準(zhǔn)確的白細(xì)胞分類結(jié)果。為臨床疾病的診斷、治療提供了重要的實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。近年來?？梢詫Π准?xì)胞進(jìn)行五分類計(jì)數(shù)的血細(xì)胞分析儀已經(jīng)普遍使用。本文就目前血細(xì)胞五分類測定中常用技術(shù)及其應(yīng)用進(jìn)展作一綜述。

1 血細(xì)胞五分類技術(shù)的原理
1.1 流式細(xì)胞術(shù)
流式細(xì)胞術(shù)（flow cytometry，F(xiàn)CM）是一種綜合應(yīng)用光學(xué)、機(jī)械學(xué)、流體力學(xué)、電子計(jì)算機(jī)、細(xì)胞生物學(xué)、分子免疫學(xué)等學(xué)科技術(shù)，使被測溶液流經(jīng)測量區(qū)域，并逐一檢測其中每一個細(xì)胞的物理和化學(xué)特性，從而對高速流動的細(xì)胞或亞細(xì)胞進(jìn)行快速定量測定和分析的方法。

首先，待測細(xì)胞經(jīng)處理或染色后被壓人流動室，與此同時，不含細(xì)胞的緩沖液在高壓下從鞘液管噴出，鞘液管人口方向與待測樣品流成一定角度，這樣鞘液就能被包繞著樣品高速流動，組成一個圓形的流束，待測細(xì)胞在包繞下單行排列，依次通過檢測區(qū)域.在激光束的照射下產(chǎn)生散射光和激發(fā)熒光。這兩個光源信號分別反映了細(xì)胞體積的大小和內(nèi)部的信息.經(jīng)光電倍增管接收后可轉(zhuǎn)換為電信號，再通過模，數(shù)轉(zhuǎn)換器.將連續(xù)的電信號轉(zhuǎn)換為可被計(jì)算機(jī)識別的數(shù)字信號，經(jīng)計(jì)算機(jī)處理，可將分析結(jié)果顯示在屏幕上。

為了保證細(xì)胞單個排列地逐一通過檢測區(qū)域，鞘流技術(shù)在流式細(xì)胞術(shù)中被廣泛應(yīng)用。根據(jù)層流理論，由于兩種液體的流速和壓力不同。在一定條件下樣品溶液與包裹它的鞘液在流動中可以保持相互分離并且同軸。同時鞘液流可以加速樣品溶液中顆粒的流動并迫使他們的流動軌跡保持在液流的中軸線上，使細(xì)胞單排列地逐一通過檢測區(qū)域，這便是所謂的液流聚焦原理

1_2 阻抗法
根據(jù)庫爾特原理，將不良導(dǎo)體血液按一定比例稀釋于等滲的電解液中，在小孔電極的兩側(cè)加一恒流源.在負(fù)壓作用下，使稀釋的血細(xì)胞通過小孔。當(dāng)細(xì)胞通過截面時會由于電阻增大產(chǎn)生相應(yīng)的脈沖，其脈沖的幅度與細(xì)胞的體積成正比，脈沖的頻度與細(xì)胞的數(shù)量成正比。這便是的庫爾特原理或稱變阻脈沖原理。利用庫爾特原理可以有效地區(qū)分淋巴及單核細(xì)胞。

1.3 激光散射法／多角度偏振光散射技術(shù)
根據(jù)光散射理論，當(dāng)激光照射到流動室內(nèi)流過的每一個細(xì)胞時，由于細(xì)胞的物理特性，部分光線從細(xì)胞上經(jīng)不同的角度散射。其中，前向小角度散射光的光強(qiáng)可以反應(yīng)細(xì)胞體積；大角度散射光的光強(qiáng)可以反應(yīng)細(xì)胞核，漿復(fù)雜度和細(xì)胞顆粒的信息；而側(cè)向散射光的光強(qiáng)可以反應(yīng)細(xì)胞膜、核膜、細(xì)胞質(zhì)的變化。因此，可以依據(jù)細(xì)胞表明光散射的特點(diǎn)對細(xì)胞進(jìn)行分類。用激光光源產(chǎn)生的單色光束直接進(jìn)入計(jì)數(shù)池的敏感區(qū)，在不同角度（10度～7O度）對每個細(xì)胞進(jìn)行掃描分析，測定其散射光強(qiáng)度，從而提供細(xì)胞結(jié)構(gòu)、形態(tài)的光散射信息。由于粗顆粒細(xì)胞的散射強(qiáng)度比細(xì)顆粒細(xì)胞更強(qiáng)，故光散射對細(xì)胞顆粒的構(gòu)型和顆粒質(zhì)量具有很好的區(qū)別能力。